セミナー趣旨

本セミナーでは、HPLC分析実務に携われている方のために、HPLCの必須知識から日常分析の現場で役立つノウハウ、さらにはトラブル発生時に慌てないための基本対処法などについて、わかりやすく解説します。

第1部:HPLCの基礎知識

1. HPLCの原理と各種パラメーター

• 1.1 クロマトグラフィーとHPLC
• 1.2 クロマトグラムの読み方
• 1.3 基本パラメーターの定義とその意味
  • 保持係数、理論段数、理論段相当高さ、シンメトリー係数、分離係数、分離度

2. HPLCにおける分離モード

• 2.1 物質の極性
• 2.2 強溶媒と弱溶媒
• 2.3 主な分離モード(吸着、分配、イオン交換、サイズ排除)

3. HPLC装置の基礎

• 3.1 送液部(送液ポンプ、脱気装置)
• 3.2 試料導入部(オートサンプラー、マニュアルインジェクター)
• 3.3 分離部(カラム、充塡剤、カラムオーブン)
• 3.4 検出部(吸光光度検出器、蛍光検出器、示差屈折率検出器他)

第2部:現場で役立つ実践ノウハウ

1. 移動相に関するノウハウ

• 1.1 水や有機溶媒、緩衝液の選び方
• 1.2 移動相調製の留意点(調製方法、脱気)

2. 試料調製と注入に関するノウハウ

• 2.1 試料溶媒の選び方
• 2.2 試料前処理の基本

3. 分離に関するノウハウ

• 3.1 逆相における分離の最適化(充塡剤、移動相、温度)
• 3.2 グラジエント溶離とその留意点

4. 検出に関するノウハウ

• 4.1 検出器の選び方
• 4.2 誘導体化検出法
• 4.3 検出器の留意点(吸光光度検出器、蛍光検出器他)

第3部:よくあるトラブルと対処のポイント

• 1. 負荷圧の上昇
• 2. ノイズの増大とドリフト
• 3. 保持時間の変動
• 4. ピーク面積の変動
• 5. 不明ピークの出現
• 6. ピーク形状の異常

質疑応答